pcr中dna模板是什么（pcr模板是gdna還是cdna）
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pcr中為什么以c dna為模板而不是以dna為模板
因為兩個模板顯示出形式不一樣
做的時候一般是提取植物總的RNA，然后采用Oligo（dT）或隨機引物利用逆轉錄酶反轉錄成cDNA。再以cDNA為模板進行PCR擴增，主要是獲得目的基因或檢測基因表達，判斷目的基因mRNA轉錄水平的相對量的變化。因為直接提取DNA的話，并不能證明該基因在其他細胞體內進行表達，通過這種方法可以克服假陽性
多聚酶鏈式反應(polymerase chain reaction)簡稱PCR技術，是一種在DNA聚合酶作用下體外擴增特異DNA片段的技術。PCR技術操作簡便，可在短時間獲得數百萬個特異的目的DNA序列的拷貝。80年代中期PCR技術的發(fā)明，引起了生物技術發(fā)展的一次革命，目前已被廣泛應用于與分子生物學相關的各個領域。
PCR技術的原理是什么?
PCR技術的基本原理：
該技術是在模板DNA、引物和四種脫氧核糖核苷酸存在下，依靠于DNA聚合酶的酶促合成反應。DNA聚合酶以單鏈DNA為模板，借助一小段雙鏈DNA來啟動合成，通過一個或兩個人工合成的寡核苷酸引物與單鏈DNA模板中的一段互補序列結合，形成部分雙鏈。
在適宜的溫度和環(huán)境下，DNA聚合酶將脫氧單核苷酸加到引物3′-OH末端，并以此為起始點，沿模板5′→3′方向延伸，合成一條新的DNA互補鏈。
PCR技術的應用：
PCR技術首次臨床應用就是從檢測鐮狀細胞和β-地中海貧血的基因突變開始的。
PCR在醫(yī)學檢驗學中最有價值的應用領域就是對感染性疾病的診斷。理論上，只要樣本有一個病原體存在，PCR就可以檢測到。
PCR技術不但能有效的檢測基因的突變，而且能準確檢測癌基因的表達量，可據此進行腫瘤早期診斷、分型、分期和預后判斷。
PCR技術基本原理
PCR是在試管中進行的DNA復制反應，基本原理與細胞內DNA復制相似，但反應體系相對較簡單，以原來的DNA為模板產生新的互補DNA片段。
PCR由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構成：①模板DNA的變性：模板DNA經加熱至94℃左右一定時間后，使模板DNA雙鏈或經PCR擴增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結合，為下輪反應做準備；
②模板DNA與引物的退火(復性)：模板DNA經加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合；
③引物的延伸：DNA模板--引物結合物在Taq酶的作用下，以dNTP為反應原料，靶序列為模板，按堿基配對與半保留復制原理，合成一條新的與模板DNA 鏈互補的半保留復制鏈。
重復循環(huán)變性--退火--延伸三過程，就可獲得更多的“半保留復制鏈”，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個循環(huán)需2～4分鐘， 2～3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。
PCR技術，即聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction，PCR）是由美國PE Cetus公司的Kary Mullis在1983年（1993年獲諾貝爾化學獎）建立的。
這項技術可在試管內的經數小時反應就將特定的DNA片段擴增數百萬倍，這種迅速獲取大量單一核酸片段的技術在分子生物學研究中具有舉足輕重的意義，極大地推動了生命科學的研究進展。它不僅是DNA分析最常用的技術，而且在DNA重組與表達、基因結構分析和功能檢測中具有重要的應用價值。
PCR可以被認為是與發(fā)生在細胞內的DNA復制過程相似的技術，其結果都是以原來的DNA為模板產生新的互補DNA片段。細胞中DNA的復制是一個非常復雜的過程。參與復制的有多種因素。PCR是在試管中進行的DNA復制反應，基本原理與細胞內DNA復制相似，但反應體系相對較簡單。
利用PCR擴增目的基因，那模板是和目的基因有關嗎?
PCR合成的時候當然不只是需要引物，模板鏈也就是目的基因片段是必須的。
因為DNA聚合酶合成DNA時只能從一段已有的DNA片段往上加脫氧核苷酸延伸子鏈，而不能從頭合成，所以需要一段引物。引物就是目的基因在5'段的一小段序列，在于模板鏈結合后，Taq酶對其延伸完成復制。
所以說模板不僅僅是和目的基因有關，應該其本身就是或含有目的基因。
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